一、酶標記

二、熒光染料標記

熒光標記技術(shù)是指將能發(fā)射熒光的標記物通過共價結(jié)合或物理吸附等方式標記于目標分子的某個基團上，從而利用標記物的熒光特性來反映研究對象的信息。常見的熒光染料包含小分子熒光染料、時間分辨熒光材料、上轉(zhuǎn)化發(fā)光材料、量子點熒光材料等。

部分常見熒光標記物的激發(fā)和發(fā)射波長

三、生物素標記

生物素標記反應(yīng)常用生物素琥珀酰亞胺酯進行。生物素是與抗體分子的游離賴氨酸等發(fā)生偶聯(lián)反應(yīng)而完成標記。一般一個抗體可以標記3-5個生物素，標記時，生物素與抗體的比率受抗體濃度影響，對于10 mg/ml 的抗體溶液來說，生物素應(yīng)超過蛋白12倍（摩爾數(shù)），對于2 mg/ml 的抗體溶液應(yīng)超過20倍，生物素也可以直接以粉末的形式加入蛋白溶液中。

四、膠體金標記

膠體金標記是利用氯金酸在還原劑作用下聚合成直徑 1~150nm的金顆粒, 形成帶負電的疏水膠溶液。由于靜電作用成為穩(wěn)定的膠體狀態(tài), 稱膠體金。

膠體金標記就是蛋白質(zhì)等高分子被吸附到膠體金顆粒表面的包被過程。吸附機理是膠體金顆粒具有高電子高密度的特性, 其表面的負電荷能與蛋白質(zhì)的正電荷基團靜電吸附而牢固結(jié)合。

不同免疫檢測實驗中經(jīng)常用到的標記物類型匯總